科技日报记者?陈曦

在多多塑料制品中，出产和使用最多的是聚对苯二甲酸乙二酯（PET）塑料，然而对于PET的降解和循环利用却是一个国际难题

。近日湖北大学性命科学学院、省部共建生物催化与酶工程国度沉点尝试室郭瑞庭教授和陈纯琪教授团队在前期工作基础之上，对PET水解酶机造进行相识析及机能提升刷新，使之拥有高效水解职能

。该钻研成就2月15日以封面文章颁发于国际学术期刊〖国化学学会-催化》上

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解析结构，助力PET水解酶刷新

塑料制品的出现给人类的生涯带来了很大的方便，人们在享受这一方便的同时，也接受着塑料传染对天然环境和人类健全的巨大负面影响，全世界都在想尽法子解决塑料传染问题

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在所有塑料制品中，PET塑料使用量巨大，当前最常用来进行PET的降解与循环再利用的步骤必要参与有毒试剂，这不仅会造成二次传染，并且降解产品很难循环再利用

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发展绿色和善的PET水解酶，并回收水解产品用于PET再生，一向是科研人员的指标之一

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“要使PET达到最好的降解成效，必要水解酶可能在PET玻璃态的温度领域内（65℃—70℃）或高于这个温度下进行反映

。”陈纯琪暗示，若是能提高PET水解酶的耐热性，一些PET塑料就能通过用酶洗濯实现回收利用，就像含酶的洗涤剂能够分化脏衣服上的食品污渍一样

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陈纯琪把稳到日本钻研团队曾颁布了一个耐热角质酶ICCG，它的最适反映温度达到了65 ℃，是已知PET水解酶中活力最高的

。“ICCG为何分歧于其他PET水解酶，水解活力和耐热性都异常凸起呢？若是能相识ICCG怪异的作用机造，我们也有可能从中得到启发，获得更具热不变性的PET水解酶

。”陈纯琪说

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郭瑞庭、陈纯琪一向深耕于PET水解酶领域，2017年团队在国际上初次解析了PET水解酶IsPETase的晶体结构，随后在2021年又初次发现了影响IsPETase水解PET的关键二元体

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“我们充分使用了团队在结构生物学和理性设计及刷新方面的钻研专长，使用结构生物学的伎俩解析了ICCG的失活突变体（S165A）与底物MHET的复合体结构

。”郭瑞庭诠释路，结构解析发现，MHET结合在酶表表的活性凹槽内，4个突变体中的2个位于MHET的结合位点左近，其中G127位于酶的表表，与MHET结合的活性凹槽邻近，I243的存在扩大了底物结合通路，这可能增长了PET的结合能力，这个特点也揭示了I234突变体可能拥有更高的PET水解活性

。”

内表两全，实现PET高效水解

“有了复合体结构作为基础，我们接下来的ICCG耐热性刷新就能够做到对症下药

。”陈纯琪诠释说，“为了增长耐热性，我们采取内表两全的战术刷新ICCG，即增长蛋白质内部的疏水相互作用和增长蛋白质表表脯氨酸的亲水相互作用

。我们共选择并构建了27个突变体，其中有7个突变体在90℃时比ICCG拥有更高的活性

。”

团队进一步将这7个突变体组合突变，筛拔获得5个活性显著提升的三突变体

。最后，优当选优，得到3种活性更高且变性温度比ICCG逾越3℃的突变体（RIP、KIP和KRP）

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为了进一步索求突变体热不变性增长的分子机造，结构生物学的伎俩被再次使用

。了局显示，突变别离在酶的表壳、中层、主题产生了不变结构的成效，“我们猜测是这些个别效应叠加起来推进了蛋白质整体的耐热性

。”陈纯琪说

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本钻研成就的获得，越发清澈地论述了PET水解酶的分子机造，同时也证了然增长耐热性对PET生物降解的沉要性

。为发展关环式循环PET生物降解平台提供了一个新的思路

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